采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见;扩增产物为环状,易于转化。DMT酶消化体外降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板)和DMT感受态细胞体内降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板),从而有效地筛选突变克隆。
设计原理:
(1) 引物与模板链退火,2xTransStart(R) FastPfu PCR SuperMix合成突变链;(2) DMT酶消化体外降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板)和DMT感受态细胞体内降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板),从而有效地筛选突变克隆。
(1) 使用2×TransStart FastPfu PCR SuperMix扩增,缩短了扩增时间,同时提高了扩增的保真性;(2) 采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见;扩增产物为环状,易于转化;(3) 同类型产品只利用体外限制性内切酶或体内感受态细胞降解非突变型质粒模板。本试剂盒综合了上述两种方法,能更有效地降解甲基化的质粒模板,突变效率更高,对照突变效率高达90%。
详见说明书。
DMT Chemically Competent Cell -70℃保存六个月;其它-20℃ 保存两年。
本产品通过在重叠区域引入突变位点的方法,利用TransStart(R) FastPfu PCR SuperMix 扩增,制备包含突变的PCR片段;利用特殊的重组酶和同源重组原理,将不多于6个片段无缝拼接,从而实现多点突变。
(1) 快速:扩增使用快速、超高保真2×TransStart FastPfu PCR SuperMix;重组反应仅需15分钟;(2) 灵活:可在载体任意位置实现单点或多点、连续或不连续突变;(3) 高效:突变效率可达90%以上。
DMT Chemically Competent Cell -70℃保存六个月;其它-20℃ 保存一年。